摘要：分別取6批樣品，按供試品溶液的制備操作，測定每粒膠囊中人參皂苷Rb1的含量，結果顯示，6批樣品中最高含量為1.28 mg 最低為0.91 mg，考慮大生產及原料來源，放寬10 %，故暫擬定本品每粒含人參以人參皂苷Rb1計，不得小于0.82 mg。
關鍵詞：健腦益智膠囊,高效液相色譜,人參皂苷Rb1,含量測定
健腦益智膠囊是由本院長期臨床驗方研制而成, 由人參、何首烏、枸杞子等藥物組成, 具補氣養血、健腦益智之功效。用于氣血兩虛導致的失眠、健忘等癥。其中人參為方中君藥, 起補中益氣之功效，皂苷類成分是人參中的主要化學成分，其中人參皂苷Rb1為主要有效成分之一。本試驗選擇以人參皂苷Rb1作為含量測定的指示性成分，針對本制劑特點，通過采用高效液相法測定人參皂苷Rb1的含量，以期為控制本制劑質量提供可靠的實驗依據。
1 器材與藥品
1.1 儀器島津LC10AC高效液相色譜儀，島津SPD10A紫外檢測器，島津C7R色譜數據處理機，SK2200H型超聲清洗器(上海科導超聲儀器有限公司)。
1.2 試藥人參皂苷Rb1對照品(中國藥品生物制品鑒定所);樣品：本院制劑室生產(批號：20031103、20031113、20031203、20031213、20031223、20040103)。本實驗所用試劑除洗脫劑為色譜純外，其它均為分析純。
2 方法和結果
2.1 色譜條件與系統適用性實驗 色譜柱：C18;流動相：乙腈水(30∶70);流速0.8 ml?min1;檢測波長203 nm;進樣量：20μl，分析方法：外標法;理論板數按人參皂苷Rb1峰計算應不低于4000，分離度大于1.5。
2.2 溶液的制備
2.2.1 對照品溶液精密稱取人參皂苷Rb1對照品2.0362 mg，置10 ml 量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得0.2 mg?ml1的對照品溶液。
2.2.2 供試品溶液取100粒膠囊內容物，研細，精密稱取10 g 置錐形瓶中，精密加入甲醇100 ml，稱定重量，超聲30 min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足損失的重量，搖勻，濾過。精密量取續濾液25 ml，置蒸發皿中，蒸干。殘渣以水飽和的正丁醇50 ml分次轉移至分液漏斗中，加氨試液振搖提取3次，10 ml/次，合并水層液，用水飽和的正丁醇提取5次，15 ml/次。合并正丁醇提取液，用正丁醇飽和的水洗滌2 次,15 ml/次。合并水層液，再以水飽和的正丁醇15 ml提搖提取2次。合并正丁醇提取液，蒸干，殘渣加甲醇轉移至10 ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm) 濾過。
2.2.3 陰性溶液的制備 按處方量稱取不含人參的其他藥味，按制劑工藝制成制劑后，以供試品溶液制備方法制成陰性溶液。
2.3 色譜分離及空白實驗取人參皂苷Rb1對照品溶液、供試品溶液及陰性溶液分別進樣，供試液色譜圖中人參皂苷Rb1峰分離良好，理論板數大于4 000 (n = 5) ，分離度均大于1.5，陰性溶液在人參皂苷Rb1出峰處不干擾。
2.4 線性關系考察精密吸取人參皂苷Rb1對照品溶液1.0，2.0，4.0，6.0，8.0 ml 置10 ml 量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，分別進樣20 μl。以峰面積與對應濃度繪制標準曲線，得回歸方程：Y= 39 307X - 51 893，r = 0.999 9。結果表明人參皂苷Rb1在0.407～3.258 mg線性關系良好。
2.5 穩定性取供試品溶液，分別放置2，4，6，8，14，24 h測定峰面積1次，RSD 為1.36 %，說明供試品在24 h 內是穩定的。
2.6 精密度實驗取0.204 mg?ml1的人參皂苷Rb1對照品溶液，重復進樣5次，測得人參皂苷Rb1峰面積的RSD為0.47%。
2.7 樣品測定
2.8 加樣回收實驗精密稱取已知人參皂苷Rb1含量的樣品(批號為20031213)6份，分別加入人參皂苷Rb1對照品，按供試品溶液的制備方法提取樣品，進樣測定，計算回收率。見表2。表2 回收率實驗(略)
3 討論
3.1 文獻報道中人參皂苷Rb1的測定方法很多[1，2]，參考上述文獻報道選擇HPLC法實驗，在流動相的選擇上我們比較了乙腈甲醇純水0. 05 %磷酸水溶液( 20∶40∶10∶30);乙腈水(40∶60)、(35∶75)、(30∶70)，結果以乙腈水(30∶70)為流動相分離效果最好，人參皂苷Rb1能與其它成分的峰達到極限分離。
3.2 在樣品提取時，選擇甲醇回流1 h，超聲提取30，45，60 min 4種方法進行了實驗比較，發現以甲醇超聲提取30 min，提取效果最好。
參考文獻：
[1]楊 瑩，景 瑞，王 妮. 頸痛片中人參皂苷Rb1 的HPLC 測定方法[J].食品與藥品，2005，7 (3A ):58.
[2]趙德華，楊德智.HPLC測定田七痛經膠囊中人參皂苷Rb1、Rg1 的含量[J].中成藥，2005，27(5):532.
