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探析某低聚木糖毒性試驗結果中藥學范文

來源:期刊VIP網所屬分類:臨床醫學時間:瀏覽:

  摘要:低聚木糖又稱木寡糖,是由2-7個木糖分子以β-1,4糖苷鍵結合而成的功能性聚合糖。與通常人們所用的大豆低聚糖、低聚果糖、低聚異麥芽糖等相比具有獨特的優勢,它可以選擇性地促進腸道雙歧桿菌的增殖活性。其雙歧因子功能是其它聚合糖類的10-20倍。文章發表在《中醫雜志》上,是中藥學畢業論文范文,供同行參考。

  關鍵詞:低聚木糖,毒性試驗

  用唾液、胃液、胰液和小腸酶液進行的消化實驗表明:各種消化液幾乎都不能分解低聚木糖,它的能量值幾乎為零,既不影響血糖濃度,也不增加血糖中胰島素水平,并且不會形成脂肪沉積,故可在低能量食品中發揮作用,最大限度地滿足了那些喜愛甜品而又擔心糖尿病和肥胖的人的要求,因此糖尿病人、肥胖病人和低血糖病人均可放心食用。

  低聚木糖在低聚糖中占有重要的地位,首先它的有效服用量在眾多低聚糖中是非常低的,就雙岐桿菌增殖作用而言,它的有效攝入量為0.7g/人·日,為低聚異麥芽糖的1/20,低聚果糖的1/10,低聚半乳糖的1/7;低聚木糖在我國的研究開發是近幾年剛剛興起的[2],我們對其中一種具有潤腸通便作用的低聚木糖片進行了毒理學安全性評價。

  結果表明該產品的小鼠急性毒性實驗為無毒物質,Ames實驗,小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核實驗,小鼠精子畸形實驗為無遺傳毒性作用,大鼠30天喂養試驗表明,各實驗組動物生長發育良好,各項指標均在本室正常值范圍內,與對照組之間差異均無顯著性,病理組織學檢查亦未見異常。說明該樣品對大鼠各項觀察指標未產生明顯毒性作用,食用該產品是安全可靠的。

  1 材料與方法

  1.1 材料

  1.1.1 低聚木糖片 由某生物科技有限公司提供。

  1.1.2 實驗動物 清潔級昆明種小鼠和清潔級Wistar大鼠由中國人民解放軍軍事醫學科學院實驗動物中心提供,合格證號SCXK-(軍)2002-001。

  1.1.3 Ames實驗菌株 由山東醫學科學院勞動衛生與職業病研究所提供。

  1.2 方法[1]

  1.2.1 小鼠急性毒性試驗 選擇小鼠20只,雌雄各10只,體重為18~22g。劑量為10g/kg.bw,灌胃給予受試物,灌胃量為0.2ml/10g.bw。觀察14天,記錄動物中毒表現及死亡情況。

  1.2.2 Ames試驗 試驗菌株為經鑒定符合要求的鼠傷寒沙門氏菌組氨酸缺陷型TA97、TA98、TA100、TA102,體外活化系統為多氯聯苯誘導的大鼠肝勻漿制備的S-9混合液。根據毒性測定結果,試驗設立200、500、1000、2500、5000μg/皿5個劑量,同時設立自發回變組、溶劑對照組和陽性對照組。試驗按照平板摻入法在加S-9與不加S-9混合液的條件下進行,每個組別設3個平皿。若受試物的回變菌落數為自發回變菌落數的2倍以上,并具有劑量—反應關系則判定為陽性。整套試驗在相同條件下重復做兩次。

  1.2.5 大鼠30天喂養試驗

  1.2.5.1 試驗方法 選用體重60~80g斷乳大鼠80只,隨機分為4組,每組20只,雌雄各半。根據人體推薦量設立3個實驗組,受試物劑量分別為0.65、1.30、2.60g/kg.bw(分別相當人推薦量的25、50、100倍),將受試物按照動物體重的10%計算食物攝入量摻入飼料中給予實驗動物,即0.65%,1.30%,2.60% (質量分數)。對照組喂飼基礎飼料。單籠喂養,自由飲食,每周稱重,記錄飼料加入量、剩余量,連續觀察30天。第30天禁食16h,第31天處死動物,取血進行血常規及血生化測定。

  1.2.5.2 觀察指標 (1)動物的一般表現、體重、食物利用率。(2)血常規及生化指標:血紅蛋白、紅細胞計數、白細胞總數及其分類、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、尿素氮、肌酐、膽固醇、甘油三酯、血糖、總蛋白、白蛋白等。(3)病理解剖:臟器系數、大體觀察及病理組織檢查(肝、腎、脾、胃及十二指腸,睪丸或卵巢)。

  2 結果

  2.1 急性毒性試驗 灌胃給予受試物后,兩種性別的小鼠均未見明顯中毒癥狀,14天內動物無死亡(見表1)。因此認為該受試物對兩種性別小鼠的急性毒性LD50均大于20g/kg.bw。根據急性毒性分級標準,該樣品屬無毒物質。

  2.2 遺傳毒性試驗

  2.2.1 Ames試驗 由表1-1、表1-2可見,兩次試驗中受試物各劑量組回變菌落數均未超過自發回變菌落數的2倍,亦無劑量-反應關系,說明在加與不加S-9時該樣品對鼠傷寒沙門氏菌TA97、TA98、TA100、TA102四株試驗菌株均未呈現遺傳毒性。

  2.2.2 小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核試驗 由表2可見,受試物各劑量組微核率與陰性對照組之間差異無顯著性(P>0.05),而環磷酰胺陽性對照組與陰性對照組之間差異有非常顯著性(P<0.01),說明該樣品無致小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核產生作用。

  2.2.3 小鼠精子畸形試驗 由表3可見,受試物各劑量組小鼠精子畸形率與陰性對照組之間差異無顯著性(P>0.05),而環磷酰胺陽性對照組與陰性對照組之間差異有非常顯著性(P<0.01),說明該樣品無致小鼠精子畸形作用。

  2.3 大鼠30天喂養試驗

  2.3.1 動物的一般表現、體重、食物利用率 實驗中各實驗組動物均未出現拒食現象,生長活動正常,體重和食物利用率結果分別見表4和表5。從表中看出各實驗組動物體重與對照組之間無顯著性差異,各實驗組動物進食量、食物利用率與對照組之間差異亦無顯著性(P>0.05)。

  2.3.2 血常規及生化指標 結果見表6、表7、表8-1、表8-2。從表中看出各實驗組的血紅蛋白、紅細胞總數、白細胞計數及其分類、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、尿素氮、肌酐、膽固醇、甘油三酯、血糖、總蛋白、白蛋白等指標均在正常范圍之內,與對照組之間差異均無顯著性(P>0.05)。

  2.3.3 大體及組織學檢查 大體觀察各實驗組未發現異常,解剖時亦未發現膀胱、肝總管結石,臟器系數未見異常(見表9)。鏡下觀察對照組和高劑量組動物少數出現肝細胞和腎間質細胞點狀壞死,灶內有炎細胞浸潤,腎小管變性等,但病變程度較輕,且無組間特異性分布。脾、胃、十二指腸、睪丸或卵巢等均未見有意義的病理改變。

  2.3.4 大鼠30天喂養試驗 在試驗期內各實驗組動物生長發育良好,體重、食物利用率、血常規、血生化、臟器系數等各項指標均在本室正常值范圍內,與對照組之間均無顯著性差異。 病理組織學檢查亦未見異常,說明該樣品對大鼠各項觀察指標未產生明顯毒性作用。

  3 討論

  低聚木糖是低聚糖中有效服用量最小的糖類,具有低聚糖的所有優良性質。它們所具有的特殊生理功能正在日益引起人類的重視,其主要生理功能包括以下5個方面:(1)低甜度、低熱量;(2)難以被人體消化吸收,食用后基本上不增加血糖和血脂,但有潤腸通便的作用;(3)對人體大腸內雙歧桿菌有明顯的增殖作用,抑制腸內有害菌群的繁殖,降低腸道內的毒性,提高機體免疫力;(4)不被口腔酶液分解,不被齲齒的鏈球菌作用,有防齲功能;(5)具有鈣、鐵吸收和間接調節血脂的功效[2]。

  作為一種新型的保健食品,我們對其進行了安全性毒理學評價試驗,結果表明,該種低聚木糖片急性經口毒性試驗中,雌雄小鼠LD50均大于20g/kg.bw,屬無毒物質,小鼠骨髓微核試驗、Ames試驗和小鼠精子畸形試驗結果為陰性,無致突變作用。大鼠30天喂養試驗期內,各實驗組動物生長發育良好,體重增重、食物利用率、臟器系數等各項指標均在本實驗室正常值范圍內,與對照組之間差異均無顯著性(P>0.05)。

  實驗組血常規及血生化各指標均在正常范圍內。大體觀察各實驗組動物的肝、腎、胃、腸、脾和卵巢/睪丸組織中,未見明顯異常。病理組織學檢查中,對照組和高劑量組少數動物的肝、腎標本出現病理改變,但這些病理改變程度較輕且無組間特異性分布,考慮與動物質量有關。脾、胃、腸、卵巢、睪丸等臟器未見明顯異常。從目前情況下可以認為食用該產品是安全可靠的。

  醫學職稱論文發表:《中醫雜志》是由中華中醫藥學會和中國中醫科學院聯合主辦的國家級中醫藥學術期刊。1955年創刊,月刊,是我國中醫藥界創刊最早的醫藥學術刊物之一,現月發行量近10萬冊,國內外公開發行。2011年《中醫雜志》[1]將改為半月刊,每月2日和17日出版。

  【參考文獻】

  1 衛生部衛生法制與監督司. 保健食品檢驗與評價技術規范.北京:中華人民共和國衛生部,2003. 177-203.

  2 袁建國,程顯好,侯永勤,等. 低聚木糖的研究開發. 精細與專用化學品,2002,10,17-19.

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