摘 要：沙門氏菌作為一種常見的病原微生物易引起食源性疾病，對人類健康和公共安全衛生造成了嚴重的影響。因此探尋和找到一種專門針對這種食源性致病菌引起危害的解決措施，顯得尤為重要。噬菌體作為細菌的天敵之一，具有安全、高效、特異性強等多重優勢，被許多科學家認為可以用來控制和解決食源性致病菌，未來利用噬菌體療法治療和控制食源性疾病或許擁有良好的應用前景。本文通過概述沙門氏菌和噬菌體的生物學特性，系統介紹沙門氏菌噬菌體的常見分離方法、分類及其在食品、工業、醫療等方面的應用，為治療食源性疾病提供一種新方案。

　　關鍵詞：沙門氏菌;噬菌體;沙門氏菌噬菌體;食源性疾病

　　沙門氏菌(Salmonella)是腸桿菌科、沙門氏菌屬中的一種典型革蘭氏陰性致病性菌，嚴重危害人體和動物的健康。根據動物感染沙門氏菌的方式可分為急性、慢性、隱性等多種感染[1]。據統計，中國每年約有1.6萬～3.6萬余次病例患者是由于感染沙門氏菌而引起的相關疾病，當人體和動物感染沙門氏菌后大多表現為無明顯癥狀，少部分表現出某些臨床癥狀，嚴重者可引起動物繁殖能力下降甚至造成死亡。因此如何有效預防和治療沙門氏菌引起的食源性疾病，已然變得迫在眉婕。目前，預防和控制沙門氏菌的主要方式為添加抗生素，然而隨著抗生素大量添加至食品中已出現明顯的抗生素濫用現象，使得沙門氏菌對抗生素的耐藥性也逐漸凸顯，致使食品中抗生素含量超標，嚴重影響食品的品質。因此，未來亟需找到一種合適的抗生素替代品用以替代抗生素的使用。研究發現噬菌體具有來源廣泛、特異性強等多重優點，或許可以利用沙門氏菌噬菌體來達到有效控制細菌性感染和治療細菌性炎癥，從而廣泛應用于農業、食品、醫療衛生、工業等多個領域[2]。

　　1噬菌體的生物學特性

　　噬菌體是指一類能夠賦予宿主菌生物學性狀的遺傳物質，也是指侵襲細菌、放線菌、真菌等微生物的一類病毒總稱，廣泛存在于自然界中，大小通常在20～200nm之間。噬菌體大部分由有尾部的蛋白衣殼包裹的線性雙鏈DNA組成，少部分由無尾部的衣殼包裹的線性單鏈DNA、雙鏈DNA或環狀RNA組成。其中單鏈DNA噬菌體在宿主體內進行DNA復制時可合成一種干擾細菌肽聚糖的酶，從而導致細菌細胞壁破裂死亡，而雙鏈DNA噬菌體則主要是通過在DNA復制末期合成有關蛋白類水解酶，使宿主細胞的細胞壁破碎死亡[3]。同時，根據噬菌體的生活周期又可分為裂解性噬菌體和溶原性噬菌體兩大類。其中裂解性噬菌體的繁殖主要依靠吸附于細菌的細胞膜表面識別相應受體，向細胞內注入遺傳物質完成基因組的復制和病毒蛋白合成，進而在宿主體內加工形成子代噬菌體。隨著現代分子生物學的高速發展和深入探索，研究發現噬菌體基因組中存在著可編碼特定酶的相關基因，這種基因編碼產生的特定酶類物質可使宿主細胞DNA與蛋白質合成轉換為一種新的噬菌體顆粒，分泌產生一種穿孔素與細胞特定膜受體結合形成孔隙，致使細胞破裂，最終導致死亡[4]。因此，噬菌體療法作為殺滅細菌的新方法未來或許可能成為新的發展趨勢和研究熱點。

　　2 沙門氏菌噬菌體的獲得方法及分類

　　沙門氏菌噬菌體一般可以直接從畜禽體內或畜禽生活區周圍環境中獲得。不同學者報道的分離噬菌體方法略有差異，但目前仍主要通過采樣、富集、分離、純化四個步驟來分離獲得。采集樣品的方法主要分為兩種，一種是直接法，直接采集宿主菌生長的生物體作為樣品進行分離獲得;另一種是間接法，根據宿主菌的生長特性從它生長的周圍環境中采集樣品間接獲得。富集培養的目的在于提高噬菌體與其宿主菌懸液混合菌體的效價，使的噬菌體分離率大幅度提高。隨后可借助5000-8000r/min的高速離心機離心5-10min使得多于雜質離心沉淀，再取上清液經0.22um的微孔濾膜過濾，除去雜菌初步分離獲得噬菌體懸液。進一步分離獲得純化的噬菌體，可采用直接涂布法或瓊脂平板涂布法將噬菌體懸液與目的宿主在培養基上混合培養獲得噬菌斑，利用噬菌斑上的噬菌體與宿主進行多次感染，以達到進一步純化噬菌體，最后，可將獲得沙門氏菌噬菌體保存于無菌EP管中并加入1滴氯仿，于4℃冰箱保存[5]。

　　目前根據最新的命名系統發現的兩種沙門氏菌，分別為邦戈沙門氏菌和腸炎沙門氏菌。其中大多為嚴格意義上的人類病原體，另一些則為與動物相關的特殊病原體，且以它們為宿主分離獲得的沙門氏菌噬菌體大多數為一種裂解性噬菌體。這種噬菌體為有尾的二十面體結構，基因組序列大小多在16～86kb范圍內，熱耐受性大多在60℃以下，酸堿耐受性大多介于5～10之間。據不完全統計，目前所獲得的沙門氏菌噬菌體在種屬分類上主要包括腸炎沙門氏菌和鼠傷寒沙門氏菌兩種噬菌體，與此同時，研究發現某些家禽中存在著一些具有一定特異性的沙門氏菌噬菌體，例如傷寒沙門氏菌和雞白痢沙門氏菌噬菌體等[6]。

　　3 沙門氏菌噬菌體的研究及應用

　　3.1沙門氏菌噬菌體在食品中的應用

　　沙門氏菌是目前最主要引起食源性疾病的致病菌之一，在食品中如何有效、安全殺滅沙門氏菌已成為一個全球化的熱點，而利用噬菌體療法或許可以解決這問題。早在1934年，美國科學家就曾利用噬菌體感染腸球菌發現對其治愈率高達90%。近年來，隨著噬菌體研究的深入推進，發現噬菌體作用于食品中的多種致病菌都有明顯殺菌的效果。有研究表明利用熒光標記噬菌體的特異位點基因跟蹤其侵染大腸桿菌，發現噬菌體可以識別并殺滅食品中大腸桿菌;或者也可將噬菌體制備成一種微囊，作用于鮮牛奶、蛋清和肉湯中對于病原菌的去除具有有顯著殺菌效果。因此，將高效安全沙門氏菌噬菌體的應用于殺滅食品中的沙門氏菌將成為可能。

　　3.2 沙門氏菌噬菌體在工業中的應用

　　不僅如此，噬菌體在工業中也有重要的應用價值。目前，有研究發現添加具有特異性的噬菌體至待測培養基中可借助其用于觀察病原菌的裂解過程，從而用于食品宿主病原菌檢驗。噬菌體還可以作為工業產品化學防腐劑的替代品在生物防治中應用，且許多研究均表明噬菌體在食品工業應用中具有經濟、高效、無副作用和可替代工業產品如抑菌劑、抗生素等多重優勢。因此，隨著噬菌體的廣泛應用和深入研究，噬菌體必將對人類生產生活產生巨大的影響。同時，沙門氏菌噬菌體作為噬菌體的一種，其可能也蘊含著一種或多種潛在應用價值。

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