新西蘭白兔靜脈注射其t1/2為5.052min，分布速率常數(shù)a為0.139min-1，說明牡荊苷在兔體內(nèi)分布較快，藥物起效迅速。t1/2β為114.291min，血漿中牡荊苷的消除速率常數(shù)β為6.177×10-3min-1，t1/2β遠大于t1/2α，說明牡荊苷在兔體內(nèi)主要以消除過程為主。

　　本實驗結(jié)果表明靜脈給予牡荊苷后其在新西蘭白兔體內(nèi)符合二房室模型藥動學特征。這與李德強[9]報道的葒草苷在大鼠體內(nèi)符合三房室模型不同，這可能與所用動物種屬不同有關(guān)。3種不同給藥方式在新西蘭白兔體內(nèi)均符合二房室開放模型，并且消除相較短，表明牡荊苷在新西蘭白兔體內(nèi)很快消除，不易蓄積中毒。

　　金蓮花是毛茛科植物金蓮花TrolliuschinensisBunge的干燥花及花蕾，主要有效成分為黃酮類化合物[1]，所含有效成分單體有牡荊苷、葒草苷、槲皮素等。現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)牡荊苷具有較強的體外抗氧化活性[2]，中等強度的抗病毒活性[3]，對缺血性心肌損傷具有良好的保護作用，其作用機制可能與增加冠脈和心肌血流量、降低血管射血阻力、降低全血及血漿黏度、提高紅細胞變形能力、抑制血栓形成等有關(guān)[4-8]。

　　牡荊苷作為從中藥中提取分離的有效成分，有必要在臨床前對其活性、安全性和藥動學進行全面的評價。金蓮花中牡荊苷以不同給藥方式在兔體內(nèi)藥動學研究及在兔體內(nèi)組織分布研究尚未見報道。本實驗采取靜脈、腹腔、肌肉注射3種不同給藥方式闡明牡荊苷在新西蘭白兔藥動學過程及靜脈注射后牡荊苷在兔體內(nèi)組織分布情況，為牡荊苷在臨床上的合理用藥提供理論依據(jù)。

　　1材料與儀器

　　美國Agilent1100HPLC(配四元泵、紫外檢測器);日本GR-202型AND分析天平;Sigma公司高速冷凍離心機;北方同正生物技術(shù)發(fā)展公司HQ-60型旋渦混合器。

　　野生金蓮花采自河北省張家口沽源，經(jīng)我院藥物研究所馬淑蘭教授鑒定為金蓮花TrolliuschinensisBunge;牡荊苷標準品(111687)，中國藥品生物制品檢定所;牡荊苷單體(純度98.8%，河北北方學院實驗中心自制);液相色譜用有機溶劑為色譜純，所用水為三重蒸餾水。其它試劑為分析純。新西蘭白兔，雌雄各半，體質(zhì)量(2.5±0.3)kg，由河北北方學院動物中心提供，室溫飼養(yǎng)1周，實驗前禁食12h，自由飲水。

　　2方法與結(jié)果

　　2.1色譜條件色譜柱為HypersilBDS-C18(4.6mm×150mm，5μm);流動相為1%乙晴-乙酸(85∶15);檢測波長為340nm;柱溫30℃，體積流量1mL/min;進樣量20μL。

　　2.2血樣及組織樣本處理取新西蘭白兔18只，禁食12h，自由飲水，隨機分為3組，每組6只，20%氨基甲酸乙酯靜脈麻醉(5mL/kg)，頸總動脈插管，以20mg/kg的劑量分別靜脈、腹腔、肌肉注射，0、2.5、5、7.5、10、15、20、25、30、45、60、90、120、180、240、300min，取血0.3mL，11000r/min離心10min，取上清液0.1mL，加乙腈沉淀蛋白，渦流混旋1min，離心，取上清液，微孔濾膜過濾即得。

　　取健康新西蘭白兔60只，按體質(zhì)量隨機分為12組，給藥前禁食12h，自由飲水。靜脈注射20mg/kg，分別于5、10、15、30、45、60、75、90、120、180、240、300min放血處死動物，立即解剖取出腎、肝、肺、脾、心、腦組織，用生理鹽水清洗各組織表面浮血，濾紙吸干，精密稱定質(zhì)量，剪碎，加生理鹽水在冰浴中制成50%勻漿，取各組織勻漿0.1mL，加乙腈0.2mL沉淀蛋白，旋渦混勻1min，11000r/min離心10min，取上清液微孔濾膜過濾即得。

　　2.3數(shù)據(jù)處理采用3P97藥動學軟件對不同給藥方式血藥濃度-時間數(shù)據(jù)進行擬合，以理論血藥濃度值與實驗測定值的相關(guān)系數(shù)最大和AIC值最小作為判斷標準，選擇適當?shù)姆渴夷Ｐ停嬎闼巹訉W參數(shù)。所有數(shù)據(jù)均用珋x±s表示，用SPSS16.0統(tǒng)計學軟件做方差分析。

　　2.4方法專屬性考察按2.1項下牡荊苷峰分離良好，血漿、各組織中雜質(zhì)及內(nèi)源性物質(zhì)均不干擾，且靈敏度高，樣品中牡荊苷的理論塔板數(shù)均大于5000，保留時間為6.96min，與相鄰色譜峰的分離度均大于3。

　　2.5標準曲線制作新西蘭白兔空白血漿、組織中加入系列質(zhì)量濃度牡荊苷對照品溶液進樣后，記錄峰面積。以峰面積為縱坐標，質(zhì)量濃度為橫坐標，經(jīng)線性回歸得牡荊苷在血漿、各組織中的標準曲線。見表1。

　　2.6精密度與穩(wěn)定性高、中、低(6.18，3.08，0.154μg/mL)3種不同質(zhì)量濃度樣品的日內(nèi)精密度RSD分別為0.74%、1.32%、3.51%，日間精密度RSD分別為0.84%、1.64%、3.63%，樣品溶液分別放置0、2、4、6、8、10、12、24h后，牡荊苷峰面積的RSD<3.2%，表明樣品在24h內(nèi)較穩(wěn)定。

　　2.7回收率試驗高、中、低(6.18，3.08，0.154μg/mL)3種不同質(zhì)量濃度樣品，HPLC測定藥物濃度，血漿以及各組織加樣回收率均大于75%，見表2。

　　2.8藥-時曲線及藥動學參數(shù)新西蘭白兔靜脈注射的藥-時曲線見圖2;腹腔、肌肉注射的藥-時曲線見圖3，不同給藥方式所得藥時數(shù)據(jù)經(jīng)3P97擬合，利用F檢驗進行方差分析，主要藥代動力學參數(shù)見表3。新西蘭白兔靜脈注射20mg/kg后，采用統(tǒng)計矩理論計算了各個組織的AUC，各組織的AUC順序為腎>肝>肺>脾>心>腦，說明牡荊苷在兔體內(nèi)各組織廣泛分布。將各組織AUC進行對數(shù)轉(zhuǎn)換后，依次進行正態(tài)性檢驗、方差齊性檢驗和方差分析，結(jié)果顯示，不同組織的AUC有顯著性差異(P<0.05)。見表4。